胎牛血清到底需不需要热灭活？

在细胞培养领域，很多研究者在使用血清时会纠结一个问题：到底要不要热灭活？

尤其是对于胎牛血清（FBS）——这被称为“细胞的黄金营养液”——有些实验室沿用旧习惯，习惯性地将其56℃热处理30分钟，以“灭活补体”。

但今天，我们想和大家从一个发育免疫学的角度，来讲明白一个结论：

对于高品质的胎牛血清，大多数实验不再需要热灭活处理！

01补体系统到底是什么？

补体系统是人体和动物先天免疫系统的重要组成部分，由30多种血浆蛋白组成。这些蛋白在遇到细菌、病毒或异常细胞时，可以：

· 直接破坏细胞膜，诱导溶解；

· 吸引免疫细胞，放大炎症反应；

· 配合抗体清除抗原。

然而，补体的这种“攻击力”，在细胞培养体系中往往是一个干扰因素，尤其是对于免疫细胞或干细胞，它们对补体非常敏感，轻则状态不佳，重则直接死亡。

02胎牛体内的补体发育情况

很多人不知道，胎牛（fetal bovine）并不是一个免疫成熟的个体。

从胚胎发育角度看：

换句话说：胎牛血清中补体天然就少，且活性弱，不具备真正意义上的细胞杀伤力。

03热灭活，反而可能适得其反？

传统的热灭活操作是在56°C水浴30分钟，用来破坏补体蛋白。

但这个步骤也有副作用：

❌ 降解了有价值的生长因子和细胞因子；

❌ 增加蛋白质聚集，形成沉淀；

❌ 批次间差异增大，影响实验可重复性；

❌ 缩短血清的有效期和活性窗口。

对于现代工艺制备的FBS产品，再做热灭活反而是一种“过

04为什么以前的细胞培养要热灭活血清？

2010年之前，国内细胞培养用的血清主要是新生牛血清，胎牛血清极少，随着肉牛屠宰的规模化，胎牛血清原料开始出现，逐渐代替了新生牛血清。因此，在新生牛血清的时代，热灭活有一定的意义，很多实验室也养成了习惯。

05哪些情况例外？仍可热灭活！

虽然大部分情况不需要，但在以下特殊情境下，热灭活仍然有意义：

● 做补体依赖性细胞毒实验（CDC）的对照组；

● 培养对补体极度敏感的原代细胞，如PBMC；

● 某些动物实验中，为排除补体变量；

● 已知某批次血清含有微量残留补体活性（通过检测或预试验判断）。